개념 한 쪽
균주활성 측정과 관리에는 무균 조작의 정확한 수행과 적절한 보존법 선택이 핵심이다. 계대배양 시에는 튜브 입구와 접종 도구의 살균·취급 원칙을 지켜 오염과 균체 손상을 방지해야 한다. 장기보존 방법으로는 동결건조와 동결보존법이 널리 쓰이며, 보존 목적과 균주의 특성에 따라 적절한 방법을 선택해야 한다.
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출제기준 단원 「균주활성 측정」의 공개 문제 3개를 묻는 꼴별로 나누면 이렇습니다.
| 묻는 꼴 | 문제 수 | 무엇을 묻나 |
|---|---|---|
| 무균 조작의 핵심 절차 판단 | 1 | 튜브 입구와 접종 도구의 적절한 살균·취급 시점을 가리는 문제 |
| 분자생물학 용어 정의 | 1 | 인트론과 엑손처럼 용어의 정의를 구분하는 문제 |
| 보존법 원리 연결 | 1 | 승화나 저온 보존 원리를 통해 적절한 보존법을 고르는 문제 |
계대배양은 미생물을 새로운 배지로 옮겨 키우는 과정으로, 외부 오염을 막기 위한 무균 기술이 필수적이다. 무균 조작의 핵심 절차는 튜브 뚜껑을 열기 전과 닫은 후에 튜브 입구를 불꽃으로 살균하는 것으로, 이 절차가 공기 중 오염미생물의 유입을 차단하는 주된 방법이다.
접종에 사용하는 바늘이나 루프는 완전히 달군 후에 바로 사용하면 열에 약한 미생물이 죽을 수 있으므로 충분히 식힌 다음 사용해야 한다. 또한 튜브의 주둥이를 장시간 가열하면 유리 손상 위험이 있으므로 짧게, 신속하게 살균하는 것이 적절하다.
균주 보존법은 목적과 적용 범위에 따라 구분된다. 동결건조는 시료를 급속 동결한 뒤 진공 상태에서 얼음을 승화시켜 물을 제거함으로써 대사 활동을 정지시켜 장기간 보존을 가능하게 하는 방법이다. 동결보존법은 초저온(-80℃ 또는 액체질소)을 이용해 대사 활동을 거의 정지시켜 균주를 장기적으로 안정 보존할 때 널리 사용된다.
균주 관리목록은 각 균주의 고유한 생장 특성·영양 요구·보존 조건 등을 기록하여 균주별로 체계적으로 관리하기 위해 작성하는 문서이다. 이러한 목록은 균주의 특성에 맞춘 올바른 관리 체계를 마련하도록 돕는 기본 도구이다.
무균 조작과 보존법의 선택은 균주의 특성과 보존 목적을 고려해 결정해야 하며, 각 방법의 원리(승화·저온에 의한 대사 억제 등)를 이해하고 적용하는 것이 중요하다.
무균 조작 관련 문항에서는 '튜브 입구는 열기 전과 닫은 후에 불꽃 살균'이라는 규칙을 핵심으로 기억하면 정답을 고르기 쉽다. 접종 도구를 바로 사용해 세포를 죽이지 않도록 반드시 식혀서 사용하는 절차도 함께 점검해야 한다. 보존 관련 문항에서는 '승화가 나오면 동결건조'를, '종에 관계없이 장기 보존'이 요구되면 동결보존법을 떠올리면 정답을 찾기 수월하다.
계대배양시 지켜야할 규칙으로 맞는 것은?
정답 ③ · 문항은 계대배양 시 무균 조작에서 준수해야 할 규칙을 묻는다. 튜브 입구는 뚜껑을 열기 전과 닫은 후에 불꽃으로 살균하여 공기 중 오염원을 차단하는 것이 표준 절차이다.
계대배양 시 멸균된 도구를 사용할 때, 튜브 입구는 열기 전후로 불꽃 살균하여 오염을 방지해야 합니다.
집적배양법(enrichment culture)을 가장 잘 설명하는 것은?
정답 ② · 문항은 집적배양법(enrichment culture)의 정의를 묻고 있다. 집적배양법은 분리원 전체를 폭넓게 키우는 것이 아니라 목적 미생물에 유리한 환경을 조성하여 그 균주가 선택적으로 증식하도록 유도하는 방법으로, 희소한 목적균을 분리·증대시키기 위한 선택적 배양법에 해당한다.
계대배양시 지켜야할 규칙으로 옳은 것은?
정답 ③ · 문항은 계대배양 등 무균 조작 시 튜브 입구와 도구의 살균·취급 규칙을 묻고 있다. 튜브의 입구는 열기 전과 닫기 직전에 짧게 불꽃으로 살균하여 공기 중 오염을 차단해야 하고, 접종 도구는 불에 달군 뒤 반드시 식혀서 사용해야 살아있는 세포를 죽이지 않는다.
멸균 작업 시 튜브 입구는 불꽃 살균으로 오염을 방지하며, 도구는 식힌 후 사용해야 미생물 죽음을 막는다.
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